如何選擇倒置顯微鏡與熒光顯微鏡?
如何選擇倒置顯微鏡與熒光顯微鏡?
顯微鏡是細胞培養及相關衍生實驗的重要儀器。目前市面上的顯微鏡種類繁多,選擇一款符合自己需求且適合的顯微鏡是一個挑戰。下面介紹倒置顯微鏡和熒光顯微鏡的原理,為您提供方便。
倒置顯微鏡的組成與普通顯微鏡相同,主要包括機械部分、照明部分、光學部分三部分。倒置顯微鏡的組成與普通正置顯微鏡相同,只是物鏡和照明系統倒置,前者在臺下,后者在臺上。這種結構使聚光系統與載物臺的有效距離顯著擴大,便于放置培養皿、細胞培養瓶(當然是玻片等)等較厚的待觀察物體,并且在同時物鏡和材料之間的工作距離不必很大。倒置顯微鏡用于醫療衛生單位、大專院校、科研院所的微生物、細胞、細菌、組織培養、懸浮液、沉淀物等的觀察。它可以連續觀察培養基中細胞和細菌的繁殖和分裂過程,并且可以對這個過程的任何形式進行拍照。廣泛應用于細胞學、寄生蟲學、腫瘤學、免疫學、基因工程、工業微生物學、植物學等領域。
熒光顯微鏡用于研究化學物質在細胞中的吸收、運輸、分布和定位。對于被檢物體,產生熒光的方式有兩種:自體熒光,紫外線照射后直接發出熒光;二次熒光,將被觀察物體用熒光染料處理后,再用紫外光照射后發出熒光。細胞中的一些物質,如葉綠素,在受到紫外線照射后會產生自發熒光;雖然有些物質本身不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色,在受到紫外線照射后也能發出二次熒光。熒光顯微鏡采用發光效率高的點光源,通過彩色濾光片系統發出一定波長的光(紫外光365nm或紫藍光420nm)作為激發光,激發標本中的熒光物質發射各種顏色的熒光,然后通過放大物鏡和目鏡觀察。這樣,在強烈反差的背景下,即使是熒光光線非常微弱,易于識別,靈敏度高。主要用于細胞結構和功能及化學成分的研究。
熒光顯微鏡分為透射型和外延型兩種,前者更原始,后者更。兩種熒光顯微鏡的基本結構相似,主要區別在于:透射激發光穿過標本,標本整體產生熒光,熒光再次進入物鏡。放大倍數越高,熒光越弱; Epi型激發光投射在試樣表面,試樣表面產生熒光,熒光進入物鏡。放大倍數越高,熒光越強,適合高倍觀察。熒光顯微鏡的主要部件有汞光源、激發濾光片、二向色鏡(外反射式)、加壓濾光片、暗場聚光鏡(透射式)等。另外,由于汞發熱嚴重燈,其中大多數還配備了吸熱過濾器。一些熒光顯微鏡還具有相差物鏡和環形光闌,因此可以進行相差觀察。還有帶倒置鏡架的熒光顯微鏡、倒置顯微鏡等。
此外,上述顯微鏡可以通過安裝CCD組裝成數碼顯微鏡,CCD將顯微鏡看到的物理圖像通過數模轉換,使其在計算機上成像。因此,我們可以通過顯示器再現傳統普通雙目觀察對微觀領域的研究,從而提高工作效率。
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